domingo, 9 de julio de 2017

Determinantes de unión al ADN y umbrales celulares para la procesividad de repetición de la telomerasa humana

La telomerasa de transcriptasa inversa añade repeticiones teloméricas a los extremos cromosómicos. La telomerasa humana purificada cataliza la síntesis de repetición procesada, que podría restaurar los 100 nucleótidos totales de (T 2 AG 3 ) n perdidos de los extremos cromosómicos replicados como un único evento de alargamiento. Se propone que la inhibición de la procesividad sea una base de la enfermedad humana, pero no se han examinado los impactos de diferentes niveles de procesividad en el mantenimiento de los telómeros. Aquí, delineamos las cadenas laterales en la cavidad del sitio activo de la telomerasa, importantes para la repetición de procesamiento de adición, determinamos cómo contribuyen a la manipulación dúplex y de ADN monocatenario y probamos las consecuencias celulares de la pérdida parcial o completa de procesamiento de repetición para el mantenimiento de los telómeros. Los hallazgos bioquímicos obligan a un nuevo modelo para la dinámica de manejo de ADN y ARN en la síntesis de repetición procesada. Los análisis biológicos implican que la procesamiento de repetición es esencial para la función de la telomerasa. Sin embargo, los telómeros pueden mantenerse por telomerasas con una procesividad inferior a la del tipo salvaje. Además, las telomerasas con baja procesividad aumentan dramáticamente los telómeros cuando se sobreexpresa. Estos estudios revelan distintas consecuencias de los cambios en la repetición de la telomerasa, la procesividad de adición y el nivel de expresión en la elongación de los telómeros y el mantenimiento de la longitud. Las telomerasas con baja procesividad aumentan dramáticamente los telómeros cuando se sobreexpresan. Estos estudios revelan distintas consecuencias de los cambios en la repetición de la telomerasa, la procesividad de adición y el nivel de expresión en la elongación de los telómeros y el mantenimiento de la longitud. Las telomerasas con baja procesividad aumentan dramáticamente los telómeros cuando se sobreexpresa. Estos estudios revelan distintas consecuencias de los cambios en la repetición de la telomerasa, la procesividad de adición y el nivel de expresión en la elongación de los telómeros y el mantenimiento de la longitud.

Sinopsis

Imagen incrustada
La repetición de procesamiento de adición (RAP) permite que la telomerasa restaure los telómeros replicados en un solo evento de alargamiento. La identificación de los determinantes de unión al ADN de la telomerasa para RAP permite el estudio de su importancia para el mantenimiento de telómeros en células humanas.
  • El tratamiento dúplex de la plantilla del producto mediante la telomerasa humana cambia con cada incorporación sucesiva de dNTP.
  • Las longitudes de productos de telomerasa protegidos por exonucleasa sugieren un dúplex máximo de aproximadamente siete pares de bases.
  • El reconocimiento de la cavidad del sitio activo del dúplex de producto-plantilla formado por el extremo 5 'de la plantilla promueve la separación del extremo 3' de la plantilla.
  • ADN de plantilla acoplada se compromete una superficie de retención de ADN de una sola hebra que retiene el ADN del producto durante la translocación de plantilla para RAP.
  • Dentro de los límites superior e inferior, la telomerasa humana RAP determina el punto de referencia para el mantenimiento de la longitud del telómero.